花卉组织培养
时间：2023-02-11 17:29:39
花卉组织培养
植物在无菌条件下，将离体的植物器官（根尖、茎尖等）、组织（形成层、花药组织等）细胞（体细胞、生殖细胞等）、胚胎（成熟或未成熟的胚）、原生质体等在入工配制的培养基上培养，给予适宜的培养条件，诱发其产生愈伤组织或潜伏芽或长成完整的植株的技术。
1.组织培养特点
(1)优点
①可以在不受植物体其他部分干扰下研究被培养部分的生长和分化的规律，并且可以利用各种培养条件影响它们的生长和分化，以解决理论上和生产上的问题。
②有力地推动了生物科学中植物生理学、生物化学、遗传学、细胞学、形态学以及农、林医、药等各门学科的发展和相互渗透，促进了营养生理、细胞牛理和代谢、生物合成、基因转移基因重组的研究。
③当前组织培养作为生物工程的一项重要技术，在基础理论研究和生产实践中发挥的作用与日俱增，可望为造福人类作出贡献。
(2)缺点
①和常规营养体繁殖比，生产成本高问题。
②组培苗的炼苗技术难、移栽成活率较低问题。
2.组织培养的分类
(1)胚胎培养：指以从胚珠中分离出来的成熟或未成熟胚为外植体的离体无菌培养。
(2)器官培养：指以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植体的离体无菌培养，如根的根尖和切段，茎的茎尖、茎节和切段，叶的叶原基、叶片、叶柄、叶鞘和子叶，花器的花瓣、雄蕊（花药、花丝）、胚珠、子房、果实等的离体无菌培养。
(③)组织培养：指以分离出植物各部位的组织（如分生组织、形成层、木质部、韧皮部表皮、皮层、胚乳组织、薄壁组织、髓部等)，或己诱导的愈伤组织为外植体的离体无菌培养。这是狭义的植物组织培养。
(4)细胞培养：指以单个游离细胞（如用果酸酶从组织中分离的体细胞，或花粉细胞、卵细胞)为接种体的离体无菌培养。
(5)原生质体培养：指以除去细胞壁的原生质体为外植体的离体无菌培养。
3.培养基和培养条件
(1)培养基成分
培养基的成分主要包括无机盐类（分大量元素和微量元素）、有机物质（即维生素等）、生长调节物质以及碳源等四大类：
①无机盐类。植物所需的十大元素，除碳、氢、氧由水和空气中供给外，其他氮、磷、钾、硫、钙、镁、铁等七种均需加到培养基中：微量元素有硼、锰、锌、钼、钻、碘、铜等。
②有机物质。主要是维生素和氨基酸，如D1和B6以及烟酸等。
③生长调节物质。主要有细胞分裂素和生长素两类。日前用得较多的细胞分裂素有激动素(KT)、6-苄基瞟吟(6BA)、玉米素(ZT)等，能促进芽的分化：生长素有明哚乙酸(IAA)、明哚丁酸(IBA)、茶乙酸(NAA),能促进根的生长。
④碳源。因组织培养时植物体处于他养状态，故必须有能源供给，主要是蔗糖。
(2)培养基的种类
①合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，但价格较贵，面且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏(Czapek)培养基等。
②天然培养基。由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，所以常被采用。
③半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。
(3)培养条件
培养条件按培养对象的种类不同而有所不同，温度条件一般在23~26掇氏度左右的恒温条件下.光照条件对器官形成有作用，一般范围是1000~3000勒克斯，每日12一16小时，高于3000勒克斯有强烈抑制作用。培养室要求清洁卫生，减少污染。
4.花卉组织培养的操作方法
(1)选择和配制培养基
培养基是植物组织培养中的“血液”，“血液”的成分及其供应状况直接关系到培养物的生长与分化，因此了解培养基的成分、特点及其配制至关重要。
(2)灭茵
灭菌是组织培养中的重要工作之一，通常采用物理的或化学的灭菌方法。培养基用常压或高压蒸煮等湿热灭菌，器械采用灼烧灭菌，玻璃器皿及耐热用具采用于热灭菌，不耐热的物质采用过滤灭菌，植物材料表面用消毒剂灭菌，物体表面用药剂喷雾灭菌，接种室等空间采用素外线或熏蒸灭菌。
(3)接种
将已消毒好的根、茎、叶等离体器官，经切割或剪裁成小段或小块放入培养基，整个接种过程要在无菌条件下进行。
(4)培养
把培养材料放在有一定光照和温度等条件的培养室里，使之生长、分裂和分化，形成愈伤组织或进一步分化成再生植株。
(5)试管苗别化移栽
试管苗是在特殊环境条件下生长的幼苗，与自然生长的幼苗有很大差异，只有通过明化使之适应自然环境后才能移栽。
植物在无菌条件下，将离体的植物器官（根尖、茎尖等）、组织（形成层、花药组织等）细胞（体细胞、生殖细胞等）、胚胎（成熟或未成熟的胚）、原生质体等在入工配制的培养基上培养，给予适宜的培养条件，诱发其产生愈伤组织或潜伏芽或长成完整的植株的技术。
1.组织培养特点
(1)优点
①可以在不受植物体其他部分干扰下研究被培养部分的生长和分化的规律，并且可以利用各种培养条件影响它们的生长和分化，以解决理论上和生产上的问题。
②有力地推动了生物科学中植物生理学、生物化学、遗传学、细胞学、形态学以及农、林医、药等各门学科的发展和相互渗透，促进了营养生理、细胞牛理和代谢、生物合成、基因转移基因重组的研究。
③当前组织培养作为生物工程的一项重要技术，在基础理论研究和生产实践中发挥的作用与日俱增，可望为造福人类作出贡献。
(2)缺点
①和常规营养体繁殖比，生产成本高问题。
②组培苗的炼苗技术难、移栽成活率较低问题。
2.组织培养的分类
(1)胚胎培养：指以从胚珠中分离出来的成熟或未成熟胚为外植体的离体无菌培养。
(2)器官培养：指以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植体的离体无菌培养，如根的根尖和切段，茎的茎尖、茎节和切段，叶的叶原基、叶片、叶柄、叶鞘和子叶，花器的花瓣、雄蕊（花药、花丝）、胚珠、子房、果实等的离体无菌培养。
(③)组织培养：指以分离出植物各部位的组织（如分生组织、形成层、木质部、韧皮部表皮、皮层、胚乳组织、薄壁组织、髓部等)，或己诱导的愈伤组织为外植体的离体无菌培养。这是狭义的植物组织培养。
(4)细胞培养：指以单个游离细胞（如用果酸酶从组织中分离的体细胞，或花粉细胞、卵细胞)为接种体的离体无菌培养。
(5)原生质体培养：指以除去细胞壁的原生质体为外植体的离体无菌培养。
3.培养基和培养条件
(1)培养基成分
培养基的成分主要包括无机盐类（分大量元素和微量元素）、有机物质（即维生素等）、生长调节物质以及碳源等四大类：
①无机盐类。植物所需的十大元素，除碳、氢、氧由水和空气中供给外，其他氮、磷、钾、硫、钙、镁、铁等七种均需加到培养基中：微量元素有硼、锰、锌、钼、钻、碘、铜等。
②有机物质。主要是维生素和氨基酸，如D1和B6以及烟酸等。
③生长调节物质。主要有细胞分裂素和生长素两类。日前用得较多的细胞分裂素有激动素(KT)、6-苄基瞟吟(6BA)、玉米素(ZT)等，能促进芽的分化：生长素有明哚乙酸(IAA)、明哚丁酸(IBA)、茶乙酸(NAA),能促进根的生长。
④碳源。因组织培养时植物体处于他养状态，故必须有能源供给，主要是蔗糖。
(2)培养基的种类
①合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，但价格较贵，面且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏(Czapek)培养基等。
②天然培养基。由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，所以常被采用。
③半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。
(3)培养条件
培养条件按培养对象的种类不同而有所不同，温度条件一般在23~26掇氏度左右的恒温条件下.光照条件对器官形成有作用，一般范围是1000~3000勒克斯，每日12一16小时，高于3000勒克斯有强烈抑制作用。培养室要求清洁卫生，减少污染。
4.花卉组织培养的操作方法
(1)选择和配制培养基
培养基是植物组织培养中的“血液”，“血液”的成分及其供应状况直接关系到培养物的生长与分化，因此了解培养基的成分、特点及其配制至关重要。
(2)灭茵
灭菌是组织培养中的重要工作之一，通常采用物理的或化学的灭菌方法。培养基用常压或高压蒸煮等湿热灭菌，器械采用灼烧灭菌，玻璃器皿及耐热用具采用于热灭菌，不耐热的物质采用过滤灭菌，植物材料表面用消毒剂灭菌，物体表面用药剂喷雾灭菌，接种室等空间采用素外线或熏蒸灭菌。
(3)接种
将已消毒好的根、茎、叶等离体器官，经切割或剪裁成小段或小块放入培养基，整个接种过程要在无菌条件下进行。
(4)培养
把培养材料放在有一定光照和温度等条件的培养室里，使之生长、分裂和分化，形成愈伤组织或进一步分化成再生植株。
(5)试管苗别化移栽
试管苗是在特殊环境条件下生长的幼苗，与自然生长的幼苗有很大差异，只有通过明化使之适应自然环境后才能移栽。
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